Допомога по Теле2, тарифи, питання

31.10.2012

Лабораторні дослідження у гінекології: що можуть розповісти мазки

Безліч важливих відомостей дає лабораторне дослідження біологічних рідин та тканин організму людини. Дослідження та вивчення складу виділень із сечостатевих органів – дає лікарям можливість діагностувати багато станів: від запалення до раку органів статевої системи.

Найчастіше жінки, які проходять обстеження у гінеколога, стикається з мікроскопічним, цитологічним та бактеріологічним дослідженням виділень.

Мікроскопічне дослідження мазків (бактеріоскопія мазка, мазок на флору)

Мазки для мікроскопічного дослідження беруться з цервікального каналу, піхви, сечівника (уретри) і іноді - з прямої кишки. Мазок береться шпателем або лопаткою, які, не пошкоджуючи слизову оболонку зазначених органів, збирають виділення, що скупчилися в їх просвіті. Перед взяттям мазків гінеколог вводить у піхву спеціальний інструмент - гінекологічне дзеркало, що дозволяє бачити стінки піхви та шийку матки.

У дівчаток і незаймана, незалежно від віку, гінекологічне дзеркало при взятті мазків не використовується.

Результати лабораторного дослідження вносяться до бланку аналізу: характеристики виділень із цервікального каналу, піхви, уретри та прямої кишки знаходяться під літерами C, V, U та R відповідно.

Епітелій- норма до 15 клітин у полі зору. У мазку з піхви виявляється плоский епітелій різних стадіях розвитку, в мазку з цервікального каналу - циліндричний епітелій. Збільшення кількості епітеліальних клітин свідчить про гостре або хронічне запалення органу. Показник інтерпретується лише у сукупності коїться з іншими даними, отриманими під час аналізу мазка.

Лейкоцити- Норма:
- для уретри - до 5 клітин у полі зору,
- для піхви - до 10 клітин у полі зору,
- для цервікального каналу – до 30 клітин у полі зору. Наявність невеликої кількості лейкоцитів забезпечує підтримку та захист органу від можливих негативних впливів. Зростання числа лейкоцитів завжди вказує на розвиток запального процесу – кольпіту, уретриту, цервіциту. При гострому запаленні кількість лейкоцитів досягає 100 і більше клітин у полі зору, іноді лаборант пише, що лейкоцити "покривають поле зору".

Слизв нормі відсутня в уретрі, у невеликій (помірній) кількості присутній у піхві. Кількість слизу в каналі шийки матки змінюється протягом менструального циклу від помірного до рясного. Наявність слизу в уретрі свідчить про можливий запальний процес.

Бактерії- в нормі у піхву у дівчаток, які не досягли статевої зрілості, і жінок у менопаузі присутня кокова флора, у жінок репродуктивного віку піхва в нормі заселена грам-позитивними паличками – лактобактеріями. Кількість мікроорганізмів у каналі шийки матки в нормі незначна (менша, ніж у піхві). У сечівнику мікрофлори в нормі бути не повинно. Поява в мазку патогенних (шкідливих) або великої кількості умовно-патогенних бактерій свідчить про запальний процес або вагінальний дисбактеріоз.

Гонокок, трихомонада, ключові клітиниу мазках у здорових жінок відсутні. Поява цих елементів свідчить про наявність гонореї, трихомоніазу та гарднерелезу відповідно.

Гриби роду Кандідадуже часто виявляються у піхву і можуть мати форму спор та міцелію. Суперечки грибів вказують на носійство кандид (це дуже поширений стан, який часто зустрічається у здорових жінок), тоді як поява міцелію - це ознака активного інфекційного процесу, викликаного грибами (кандидоз або молочниця).

За допомогою бактеріоскопії мазкаможна виявити неспецифічні запальні процеси (вагініт, кольпіт, цервіцит), спричинені активацією умовно-патогенної флори, гонорею, трихомоніаз, кандидоз, гарднереллез, запідозрити бактеріальний вагіноз та хламідіоз.

Щоб результат мазка на флору був інформативним, важливо дотримуватись деяких правил підготовки до дослідження.

Цитоморфологічне дослідження мазків (цитологія, мазок на атипові клітини або пап-тест)

Метою цього дослідження є виявлення атипових клітин, що сигналізують про наявність патології шийки матки, насамперед дисплазії або раку шийки матки. Також за допомогою Пап-тесту діагностується папіломавірусна інфекція, тісно пов'язана з дисплазією та раком.

Матеріал для дослідження береться з поверхні піхвової частини шийки матки (шпателем) та з цервікального каналу (спеціальною щіточкою). Матеріал наноситься на предметне скло та вирушає до лабораторії.

Залежно від результату дослідження виділяють 5 типів мазків:

Тип 1- Клітковий склад матеріалу (цитограма) без особливостей. Такий результат тесту означає, що з шийкою матки все гаразд.
Тип 2- клітинний склад відповідає запальному процесу чи дисплазії легкого ступеня. При отриманні такого результату гінеколог зазвичай призначає лікування запального процесу з подальшим повторним проведенням Пап-тесту.
Тип 3- ознаки помірної чи вираженої дисплазії. У такій ситуації необхідно проводити додаткове обстеження, що включає кольпоскопію, біопсію тканин шийки матки та гістологічне дослідження одержаного матеріалу.
Тип 4- підозра на рак, передраковий стан. Отримавши такий результат тесту, жінка прямує на консультацію, дообстеження та лікування до онкогінеколога.
Тип 5- рак. Додаткове обстеження та лікування проводиться в умовах онкологічного диспансеру.

Так само як і у випадку з мазком на флору, інформативність цитологічного дослідження залежить від правильності підготовки жінки та взяття матеріалу.

Бактеріологічне дослідження урогенітальних виділень (бакпосів)

Бактеріологічне дослідження виділень із посівом матеріалу на спеціальні середовища використовується для конкретизації складу мікрофлори статевих шляхів. Завдяки цьому дослідженню визначається наявність та кількість представників нормальної, умовно-патогенної та патогенної флори. Нерідко разом із бакпосівом проводять дослідження чутливості мікроорганізмів до антибіотиків (антибіотикограма).

У урогенітальних виділеннях здорової жінки можуть міститися такі мікроорганізми (кількість зазначено в КУО - колонієутворюючих одиницях):

Іноді у бланку результатів бакпосева вказується ступінь зростання колоній мікроорганізмів. І та ІІ ступеня зростання вказують на те, що жінка є безсимптомним носієм того чи іншого мікроорганізму, III та IV ступеня зростання свідчать про те, що даний мікроорганізм відіграє провідну роль у розвитку виявленого у жінки захворювання (запального процесу).

Матеріал для бактеріологічного дослідження береться майже так само, як мазки на флору. Основною вимогою щодо підготовки до дослідження є скасування всіх антибактеріальних препаратів за 2 тижні до дослідження. Матеріал на бакпосів здається будь-якого дня менструального циклу.

Бакпосів не є дослідженням, яке проводиться регулярно та з профілактичною метою. Для проведення бакпосіву потрібні показання – запальний процес чи наявність підозри на бактеріальний вагіноз.

Будь-який лабораторний аналіз надає масу інформації, яка стає корисною тільки в руках лікаря. Навіть знаючи межі нормальних показників, якими оперує конкретна лабораторія, пацієнт не зможе зрозуміти глибинне підґрунтя виявлених змін - у нього просто не вистачить досвіду та знань. Саме тому дослідження мазків, як і інші лабораторні аналізи, має проводитись під керівництвом грамотного, вдумливого лікаря.

продовження теми статті:

Федеральне агентство з охорони здоров'я

та соціального розвитку

Ставропольська державна

медична академія

Факультет післядипломної освіти

Тема: Дослідження відділень жіночих статевих органів

Науковий керівник:

д. м. н., професор

Первушин

Виконала:

Курсант циклу

"Клінічна лабораторна діагностика"

Бороздіна І.Б.

Ставрополь, 2008 р.

Вступ

Глава I. Теоретичні основи дослідження жіночих статевих органів, що відокремлюється.

Розділ II. Характеристика неспецифічних та специфічних фолнових процесів піхви, шийки матки та порожнини матки

Висновок

Вступ

Гінекологічне дослідження - сукупність методів дослідження, за допомогою яких визначають анатомо-функціональний стан статевої сфери та виявляють захворювання статевих органів.

Актуальність проблеми дослідження гінекологічних мазків викликана тим, що рак тіла та шийки матки за частотою займають одне з перших місць серед злоякісних новоутворень у жінок.

В даний час у всіх економічно розвинених країнах відзначається зменшення захворюваності на рак шийки матки. Основний напрямок боротьби з цим захворюванням полягає в активному його виявленні при масових профілактичних оглядах практично здорових жінок, а також своєчасна діагностика та раціональне лікування фонових та передракових захворювань шийки матки, що здійснюється у оглядових кабінетах і жіночих консультаціях.

Оглядовий жіночий кабінет входить до складу відділення профілактики. Завданнямикабінету є здійснення профілактичного огляду жінок з 18 років з метою раннього виявлення гінекологічних захворювань, передпухлинних та ракових захворювань жіночих статевих органів та інших видимих ​​локалізацій (шкіри, молочних залоз).

Активне виявлення онкологічних хворих, особливо з початковими формами раку в доклінічній стадії хвороби, є основним принципом гінекології та онкології.

З позицій активного виявлення дисплазій та раннього ракушийки матки найважливішого значення набуває організаційних питань проведення масових гінекологічних оглядів, однією з є раціональна організація цитологічної служби, покликаної забезпечити максимальну ефективність оглядів шляхом проведення цитологічних досліджень в кожної оглянутої жінки.

Проведення масових гінекологічних профілактичних оглядів включає 2 основні завдання:

Ранні та своєчасні виявлення раку шийки матки, у тому числі й у доклінічній стадії процесу.

Визначення різних непухлинних захворювань, які потребують активного лікування.

Виконання зазначених завдань веде до зниження захворюваності на рак, зменшення кількості запущених форм та поліпшення результатів лікування.

Профілактичні огляди жінок проводяться не рідше 1 разу на рік акушеркою або лікарем - гінекологом оглядових кабінетів при поліклініках, підприємствах, а також при диспансеризації осіб, які працюють в умовах професійної шкідливості.

Глава I. Теоретичні основи дослідження жіночих статевих органів, що відокремлюється.

Матеріалом для дослідження найчастіше служать піхви, що відокремлюється, мазки з поверхні шийки матки, мазки з цервікального каналу і відсмоктування з порожнини матки.

Досліджують також мазки - відбитки, зіскрібки зі слизової оболонки жіночих статевих органів.

Дослідження може проводитись у динаміці як у стаціонарних, так і в лабораторних умовах.

Приготування та фарбування препаратів.

Мазки беруть із верхньо-бічної частини склепіння піхви. Матеріал, що вільно відторгається, наносять на край предметного скла і легким рухом розмазують ребром іншого шліфованого скла.

Перед фарбуванням мазок просушують на повітрі.

Як фіксатора використовують 96° етиловий спирт, суміш Никифорова, що складається з рівних частин 96° етилового спирту та ефіру, розчин Лейшмана (що складається з 1 л метанолу і 2, 5 г фарби Лейшмана), а також фіксують над полум'ям пальника.

Забарвлення мазків. Існують мономорфні та поліморфні методи фарбування мазків.

При поліморфних методахзабарвлення клітини, залежно від їх типу та фізико-хімічних властивостей цитоплазми, забарвлюються диференційовано в червоно-оранжевий або синьо-зелений кольори.

Мономорфні методи.

Забарвлення гематоксиліну - еозином.Мазок підсушують на повітрі, фіксують у суміші Никифорова або 96° етиловому спирті протягом 7 - 10 хв. Потім фарбують водним розчином гематоксиліну (гематоксилін - 1, 0 г., калійні галун - 50, 0 г., йодид натрію - 0, 2 г., дистильована вода - 1000 мл. Розчин витримують на світлі 14 днів, після чого він готовий до вживання). Протягом 7 – 10 хв до одержання слабо – фіолетового фарбування. Далі мазок промивають проточною водою і фарбують 0,3% спиртовим розчином жовтуватого еозину або 1% водним розчином еозину протягом 1 хвилини. Потім промивають проточною водою і висушують.

Забарвлення метиленовим синім.На підсушений препарат наносять 1 - 2 кап.1% водного розчину метиленового синього та накривають покривним склом. Через 1 - 2 хв препарат промивають дистильованою водою до знебарвлення, яке проводиться наступним чином: на один край мазка наносять 1 - 2 краплі води, що дистилює, а до іншого підносять фільтрувальний папір. Потім висушують та мікроскопують.

Забарвлення фуксином.На підсушений препарат наносять на 1 хв. Розчин фуксину (3 р. фуксину розчиняють в 1 л.96° спирту і до 12 мл цього розчину додають 100 мл дистильованої води). Потім промивають водою, просушують та мікроскопують.

Методика фарбування за Лейшманом.Висушені на повітрі препарати заливають фарбою Лейшмана на 3 хв, при цьому препарат одночасно фіксується. Після цього промивають водопровідною водою і заливають азур - еозиновою сумішшю (40 мл.0, 1% азура II та 30 мл.0, 1% еозину К) на 15 - 20 хв. Потім промивають водопровідною водою, висушують на повітрі та мікроскопують.

Методика фарбування за Романовським.Фіксовані 96 ° спиртом або сумішшю Никифорова мазки заливають робочим розчином фарби Романовського - Гімзи на 20 - 25 хв. Потім промивають проточною водою та висушують.

Поліхромні методи.

Забарвлення за Папаніколау.Мазки фіксують у суміші Никифорова 25 хв., після чого проводять їх через серію спиртів, що знижує концентрації: 96°, 80°, 70° та дистильовану воду (у кожному розчині мазки слід прополоскати). Далі мазки фарбують гематоксиліном Гарріса або Боммер протягом 50 хв. Промивають у 2 судинах з дистильованою водою 1 - 2 секунди та диференціюють у 3% розчині їдкого амонію (1 хв). Після диференціювання мазки проводять через спирт, що підвищує концентрацію: 70° (двічі), 80°, 95°. Фарбують розчином з барвником оранж G (1 хв) і проводять через 2 судини з 70° спиртом. Потім мазки фарбують поліхромним барвником 1, 5 хвилини і проводять через 95° спирт у 3 судинах, потім суміш рівних частин абсолютного спирту і ксилолу. Через ксилол (1 хв) і поміщають у канадський бальзам.

Забарвлення за Докумовим.Вологі мазки фіксують протягом 30 хв сумішшю Никифорова, після чого, не підсушуючи, наливають на них гематоксилін на 2 - 3 хв, після чого зливають і мазки промивають проточною водою. Далі мазки фарбують поліхромним барвником протягом 1 - 2 хвилин, потім зливають, промивають препарати 70° і 95° спиртом, висушують і поміщають в канадський бальзам.

Під час усіх етапів фарбування мазки не повинні висихати.

Поліхромний барвник:еритрозин – 0,25 г, ліхтгрюн – 0,2; фосфорно-вольфрамова та фосфорно-молібденова кислоти по 0,2; оранж G – 0,1 г; крижана оцтова кислота- 1 г; етиловий спирт – 50° – 100 мл.

Розчин барвника витримують протягом кількох днів для дозрівання.

Морфологічні особливості епітелію піхви.

До складу епітеліальних клітин піхви, що відокремлюється, в нормі, подібно до гістологічної структури покривного багатошарового плоского епітелію піхви і піхвової частини шийки матки відображає стан функції яєчників.

При проліферативній фазі багатошаровий плоский епітелій досягає товщини 300 - 400 мкм, має добре виражені ознаки вертикальної анізоморфності, і складається з трьох шарів: базального, проміжного та поверхневого.

При секреторній фазі менструального циклу багатошаровий плаский епітелій має товщину до 200 мкм. Частина клітин функціонального шару над сосочками злущена. Глікоген виявляється у вигляді незначних скупчень в окремих клітинах проміжного та функціонального шарів. У підепітеліальному сосочковому шарі сполучної тканини видно скупчення лімфоїдних клітин та гістіоцитів.

При десквамативної та регенеративної фазах спостерігається злущування більшої частини клітин функціонального та проміжного шарів. Багатошаровий пласт, що зберігається на поверхні слизової оболонки, нахистує всього 4 - 12 шарів і товщину до 42 - 96 мкм.

У жінок, які перебувають у клімактеричному періоді та менопаузі, багатошаровий плоский епітелій піддається атрофії.

Розглянемо структуру клітин багатошарового плоского епітелію.

Клітини поверхневого епітеліювеликі (діаметром від 40 до 50 мкм), переважно полігональні, рідше - округлі або овальні з точними межами. Ядра клітин центрально розташовані, дрібні, інтенсивно забарвлені, пікнотичні, діаметром трохи більше 6 мкм. Цитоплазма світло - блакитна при фарбуванні за Лейшманом, Романовським-Гімзом і виявляються дрібні вакуолі.

Велика кількість клітин епітелію з пікнотичними ядрами свідчить про високу естрогенну активність. Найбільш багаті на мазки клітинами поверхневого епітелію в пізній фолікуліновій фазі.

Клітини проміжного шару багатошарового плоского епітелію у нормі становить трохи більше 10%. Форма їхня полігональна або овальна. Діаметр клітин 25 – 30 мкм. Цитоплазма забарвлена ​​базофільно. Ядерно-цитоплазматичне співвідношення збільшено. Форма ядер бульбашкоподібна, округла або овальна. Хроматин ніжно – сітчастий або ніжно – зернистий. Клітини розташовуються розрізнено і як пластів різної величини.

Оскільки під впливом паличок Додерлейна можливий цитоліз клітин, то мазках виявляються голі ядра.

Клітини нижніх рядів проміжного шару відносяться до парабазальним і становлять трохи більше 5% всіх клітин епітелію. Вони різного розміру (від 12 до 30 мкм), округлої, овальної чи полігональної форми. Ядра їх за величиною аналогічні ядра клітин проміжного шару. Цитоплазма забарвлена ​​базофільно, містить вакуолі.

Особливу групу клітин проміжного шару епітелію становлять так звані човноподібні клітини.Трапляються при вагітності. Форма їх витягнута, ядра розташовуються ексцентрично, цитоплазма багата на глікоген і під впливом бактерій піддається цитолізу.

Переважна більшість клітин проміжного шару спостерігається на початку фолікулінової та під час лютеїнової фаз, післяпологовому періоді, у менопаузі, і вказує на недостатність естрогенних гормонів.

Збільшення кількості парабазальних клітин може свідчити про патологічний процес у шийці матки.

Парабазальні клітинимають округлу, овальну, іноді полігональну форму з точними межами, діаметр клітин у межах

30 мк. Ядра мають ніжну тонкопетлисту або дрібнозернисту мережу хроматину; іноді видно ядерце. Цитоплазма різко базофільна, глікоген виявляється не завжди.

Парабазальні клітини можуть виявлятися в мазках з піхви під час менструації та під час менопаузи.

Базальні клітинибагатошарового плоского епітелію дрібні, ядерно-цитоплазматичне співвідношення дорівнює 1:3. Ядро округле, хроматин дрібнозернистий, містить 1 - 2 ядерця. Цитоплазма у вигляді вузького обідка, різко базофільна.

У мазках здорових жінок базальні клітини з'являються лише під час менопаузи. Поява в мазках значного числа парабазальних та базальних клітин характерна для патологічного процесу шийки матки.

У мазках з піхви поряд з епітеліальними клітинами можуть бути інші елементи, зокрема, еритроцити, лейкоцити. Особливо багато лейкоцитів виявляється після менструації. Їх можна виявити у мазках у період менопаузи.

Ендоцервікс у нормі вистелений високим призматичним епітелієм, що містить слиз, під яким на базальній мембрані знаходяться резервні клітини. Призматичний епітелій ендоцервіксу змінюється залежно від фаз оваріально-менструального циклу.

При проліферативну фазу менструального циклу клітини призматичного епітелію мають базальне розташування ядер, найбільша висота призматичних клітин (до 30 - 36 мк) спостерігаються при секреторній фазі. При цьому ядра клітин призматичного епітелію переміщуються до їхнього центру. Відзначається гіперплазія резервних клітин з утворенням солідних та залізистих структур. У фазі регенерації епітелій слизової оболонки ендоцервіксу є низькопризматичним.

У період клімаксу та менопаузи відзначаються епідермізація ендоцервіксу, кістозне розширення залоз та атрофія призматичного епітелію, особливо в ділянці кіст. Резервні клітини трапляються рідко. Значна кількість резервних клітин, виражена їхня проліферація з утворенням багатошарових пластів, метаплазованого багатошарового плоского епітелію, новоутворенням залоз відзначається в період вагітності та при дисгормональних порушеннях.

При цитологічному дослідженні мазків із цервікального каналу виявляються епітеліальні клітини слизової оболонки різної величини. Вони розташовані ізольовано або у вигляді груп залізистоподібних структур, що мають призматичну форму; овальні чи круглі ядра з ніжним дрібнодисперсним хроматином. Цитоплазма клітин слабо базофільна, в апікальній частині містить зерна слизу.

Поряд із клітинами секреторного призматичного епітелію зустрічаються війчасті клітини; вії добре виражені на апікальній поверхні. У ряді випадків епітеліальні клітини в мазку розташовуються не вздовж тіла клітини, а впоперек. У цьому клітини виглядають округлими чи полігональними, а ядра розташовані центрально. У мазках можуть виявлятися резервні клітини призматичного епітелію. Резервні клітини округлої форми, зі мізерною блідо цитоплазмою, що фарбується, і круглим ядром, що займає майже всю цитоплазму. Хроматин ядра нечіткий. При дослідженні мазків, взятих у жінок у секреторній фазі менструального циклу, під час вагітності та при дисгормональних змінах можна виявити клітини метаплазованого багатошарового плоского епітелію, які схожі на клітини багатошарового плоского епітелію. Однак цитоплазма їх містить слиз або глікоген та слиз.

При вагітності поряд з подібними епітеліальними елементами нерідко відзначаються і децидуальні клітини, що відпадають.

У мазках вмісту піхви здорової, зрілої у статевому відношенні жінки бактеріальна флора зазвичай представлена ​​грампозитивними паличками Дедерлейна, що належать до роду Lactobacillus.

Піхва новонароджених приблизно в половині випадків є стерильним. Найближчим часом після народження з'являється мізерна кокова флора. До настання статевої зрілості у дівчаток так само, як і у жінок у менопаузі, у вмісті піхви спостерігається кокова флора. При досягненні статевої зрілості (з появою менструацій) мікрофлора піхви стає паличкоподібною.

Залежно від мікрофлори та характеру клітинного вмісту розрізняють 4 ступеня чистоти піхви.

Перший ступінь.У вмісті піхви присутні палички Дедерлейна, нерідко розташовані по дві поряд, і епітеліальні клітини, можлива наявність поодиноких лейкоцитів та слизу; рН 4,0 – 4,5. Така картина піхви здорової жінки зустрічається рідко.

Мікроскопічно виділення мають вигляд добре звареного крохмалю.

Другий ступінь.Паличок Дедерлейна менше, з'являється кокова флора, спостерігаються епітеліальні клітини, часто лейкоцити, велика кількість слизу; рН 5,0 – 5,5. Мікроскопічно виділення напіврідкі, білуваті. Подібний вміст піхви зустрічається найчастіше.

Третій ступінь.Незначна кількість паличок Дедерлейна, різноманітна кокова флора (у тому числі стрепто- та стафілококи), удосталь comavariabile. Багато лейкоцитів, є епітеліальні клітини; рН 6,0 – 7,2. Макроскопічно вміст піхви жовтуватий, рідкий. Така картина характерна для запального процесу у статевих органах.

Четвертий ступінь.Палички Дедерлейна відсутні; виявляється велика кількість лейкоцитів, різноманітні мікроорганізми (стафіло-, стрептококи, кишкові палички, іноді трихомонади); рН понад 7,2. Мікроскопічно – рясний жовтий гнійний секрет, при трихомонадному кольпіті пінистий. Цей ступінь чистоти піхвового вмісту характерний для яскраво вираженого запального процесу.

Виділяють також нульовий рівень чистоти, при якій мікроорганізми відсутні, але є лейкоцити. Така картина піхвового вмісту спостерігається після лікування сульфаніламідними препаратами, антибіотиками та після спринцювання.

Розділ II. Характеристика неспецифічних та специфічних фолнових процесів піхви, шийки матки та порожнини матки

Дослідження трихомонади.

Трихомонади можуть виявлятися у піхву жінок і дівчат, у сечівнику, сечовому міхурі та прямій кишці. Вони можуть бути у вигляді цистоїдних (нерухомих, без джгутиків), більш стійких форм.

Піхвові патогенні трихомонади, є збудниками вагінального кольпіту, цервіциту, уретриту.

При трихомоніазі виділення з піхви рідкі, білувато. жовтого кольору, пінисті. Хворі скаржаться на свербіж у сфері статевих органів.

У нативному препараті піхвові трихомонади виявляються легко, якщо вони рухливі.

Трихомонади можна фарбувати фуксином, барвником Романовського, метиленовим синім та ін. Найкраще вони фарбуються барвником Романовського. При цьому піхвові трихомонади мають вигляд овальних клітин з пінистою протоплазмою, пофарбованої в блакитний колір, і блідо - фіолетовим блефаробластом.

Дослідження на гонококи.

При підозрі на гонококову інфекцію у жінок досліджують канал шийки матки і сечовипускального каналу, що відокремлюється. Мазок фарбують за Грамом.

Забарвлення за Грамомвимагає особливої ​​ретельності, тому що при недостатньому знебарвленні гонококи можуть зберігати забарвлення Грама. При занадто тривалому знебарвленні забарвлення Грама можуть втрачати інші грампозитивні коки (стафілококи, стрептококи). Це може призвести до помилкових результатів.

Спосіб забарвлення за Грамом.

Реактиви.1. Карболовий розчин генціанвіолету.

2. Розчин люголю.

3.96 ° спирт.

4. Водний розчин карболового фуксину.

Хід дослідження.

На фіксований препарат кладуть смужку фільтрувального паперу та наливають розчин генціанвіолету. Фарбують 1,5 – 2 хвилини.

Папірець скидають та заливають препарат розчином Люголя на 2 хв.

Розчин Люголя зливають і прополіскують препарат у спирті до сірого кольору.

Промивають водою та фарбують водним розчином карболового фуксину.

Промивають водою, висушують препарат на повітрі та мікроскопують.

Дослідити вміст піхви дорослої жінки на гонококи недоцільно через розмаїття бактеріальної флори. Основна локалізація гонореї – сечівник і канал шийки матки.

У маленьких дівчаток внаслідок незрілості плоского епітелію, що покриває піхву, гонококова інфекція проявляється у вигляді вульвовагініту.

При мікроскопічному дослідженні виділень у разі гострої гонореї в препараті виявляються розташовані переважно всередині нейтрофільних гранулоцитів, згруповані в шаховому порядку гонококи у разі хронічної – переважно позаклітинно розташовані.

При хронічній гонореї можуть з'являтися дегенеративні форми гонококів. У першій стадії дегенерації спостерігаються слабозабарвлені мікро- та макроформи гонококів; у другій – вони втрачають свою типову ниркоподібну форму та стають напівкруглими; у третій - вони округляються у вигляді кулястих диплококів; у четвертій стадії – стискаються у вигляді окремих точок.

Для типової гонореї на стадії загострення характерна наявність великої кількості нейтрофільних гранулоцитів; гонококи розташовані як усередині них, так і позаклітинно. Іншої бактеріальної флори немає.

При хронічному гонореї, що латентно протікає, багато нейтрофільних гранулоцитів. Гонококки та інші мікроорганізми відсутні.

Наявність великої кількості нейтрофільних гранулоцитів з напівзруйнованими, дегенеративно зміненими ядрами та цитоплазмою, паличок Дедерлейна та різноманітність банальної мікрофлори для гонореї нехарактерна, а після її лікування може бути ознакою одужання.

Відповідно до наказу МОЗ СРСР № 936 від 12 липня 1985 р. "Про уніфікацію лабораторних методів дослідження в діагностиці гонореї та трихомоніазу", використовуються наступні методи виявлення гонококів та піхвових трихомонад у досліджуваному матеріалі.

Виявлення гонококів та піхвових трихомонад у досліджуваному матеріалі, пофарбованому метиленовим синім.

Реактиви.1.1% водний розчин метиленового синього;

2.96 ° етиловий спирт.

Устаткування: мікроскоп з освітлювачем, пісочний годинник, штативи.

Приготування препаратів. Матеріал наносять на чисте знежирене предметне скло тонким рівномірним шаром, висушують на повітрі.

Забарвлення.Препарат фіксують 3 хвилини в 96° етиловому спирті, висушують і наносять на 1 хв 1% розчин метиленового синього, після чого ретельно змивають барвник, що залишився водою і висушують у штативі.

Мікроскопія. Дослідження проводять з природним або штучним освітленням (об'єктив 90 х імерсійний, окуляр 7 х або 10 х; імерсійна олія - ​​кедрова).

Ядра клітин пофарбовані в синій колір, протоплазма – у блакитній різній інтенсивності. Гонококи темно-синього кольору, різко окреслені, бобоподібної форми, парні; розташовуються внутрішньоклітинно, у слизу та на епітеліоцитах.

Піхвові трихомонади відрізняються поліморфізмом (округлі, овальні, полігональні), розташовані в слизу між клітинними елементами; вони чітко видно оболонка; ядро розташоване ексцентрично та інтенсивно забарвлене в синій колір, цитоплазма ніжна, сітчаста, світло-синя; вакуолі безбарвні.

Виявлення гонококів та піхвових трихомонад у досліджуваному матеріалі, пофарбованому еозином та метиленовим синім.

Реактиви.1.1% розчин еозину в етиловому спирті.

2.1% водний розчин метиленового синього.

Забарвлення.Без попередньої фіксації препарати занурюють на 10 - 15 с в 1% розчин еозину, змивають струменем водопровідної води і заливають 1% розчином метиленового синього на 1 - 2 хв, потім ретельно змивають барвник, що залишився водою, і висушують у штативі.

Забарвлення цим методом передбачає виявлення, поряд з гонококами та піхвовими трихомонадами та еозинофільних гранулоцитів.

Мікроскопія.Препарат синього кольору: ядра клітин пофарбовані у синій, цитоплазма – у блакитний колір різної інтенсивності. За наявності еозинофільних гранулоцитів у цитоплазмі є зернистість червоного або яскраво-рожевого кольору. Слиз блакитного кольору. Бактеріальна флора пофарбована у синій колір різної інтенсивності. Гонококи темно-синього кольору, різко окреслені, бобоподібної форми, парні; розташовуються внутрішньоклітинно, у слизу та в епітеліальних клітинах.

Піхвові трихомонади: ядра овальні, синього кольору, ексцентрично розташовані, цитоплазма чітко окреслена, сітчаста, світло - синя; вакуолі безбарвні.

Виявлення гонококів та піхвових трихомонад у досліджуваному матеріалі, пофарбованому діамантовим зеленим.

Реактиви.1.0,5% водний розчин діамантового зеленого.

2.96 ° етиловий спирт.

Забарвлення.Препарат фіксують 3 хв 96° етиловому спирті, висушують, наносять 0,5% розчин діамантового зеленого на 1 хв. Потім ретельно змивають барвник під струменем. холодної водиі висушують у штативі.

Мікроскопія.Препарат зеленого кольору: ядра клітин пофарбовані в зелений колір, цитоплазма - у світло-зелений. Слиз зеленого кольору. Бактеріальна флора забарвлена ​​у зелений колір різної інтенсивності. Гонококи темно-зеленого кольору, чітко окреслені, бобоподібної форми, парні, розташовуються внутрішньоклітинно, у слизу та на епітеліальних клітинах. Піхвові трихомонади з чіткою оболонкою, поліморфні (округлі, овальні, полігональні), розташовані між клітинними елементами або слизу. Ядро інтенсивно забарвлене у зелений колір, розташоване ексцентрично. Цитоплазма сітчаста, світло-зеленого кольору; вакуолі безбарвні.

Виявлення гонококів і піхвових трихомонад у досліджуваному матеріалі, забарвленому модифікованим способом Грама.

Метод заснований на властивості гонококів, піхвових трихомонад та інших грамонегативних мікроорганізмів віддавати основний фіолетовий барвник при знебарвленні протягом певного часу в етиловому спирті і на властивості дофарбовуватися надалі додатковим оранжево-червоним барвником.

Реактиви.1.1% водний розчин кристалвіолету.

2. Водний розчин Люголю.

3.96° етиловий спирт.

4.1% водний розчин нейтрального червоного.

Забарвлення.Препарат покривають фільтрувальним папером та заливають його

1% водним розчином кристалвіолету на 1 хв.

Для того щоб між фільтрувальним папером та предметним склом не було бульбашок повітря, смужку фільтрувального паперу, змоченого кристалвіолетом, придавлюють скляною піпеткою або паличкою до скла.

Через 1 хвилину видаляють фільтрувальний папір, препарат промивають струменем водопровідної води і заливають на кілька секунд розчином Люголя до почорніння мазка.

Потім залишок розчину Люголя змивають і знебарвлюють препарат у 96° етиловому спирті, по черзі занурюючи та виймаючи препарат із спирту, що знаходиться у стаканчику.

Знебарвлюють препарат до тих пір, поки з його тонких ділянок не будуть стікати фіолетові цівки барвника і вони набудуть блідо-сірого кольору.

Після цього препарат швидко промивають під струменем водопровідної води і дофарбовують протягом 3 хв 1% водним розчином нейтрального червоного, знову ретельно промивають (поки струмінь води, що стікає з нього, стане прозорим) і висушують.

Мікроскопія.При правильному забарвленні препарат повинен мати оранжево-червоний колір на тонких ділянках та лілово-фіолетовий – на товстих. Ядра клітинних елементів (лейкоцитів, епітеліальних клітин), що частково утримують основне фіолетове забарвлення, повинні бути пофарбовані в центрі у фіолетовий колір, по переферії - в оранжево - червоний, а гонококи, розташовані в лейкоцитах та на епітеліальних клітинах, повинні мати оранжево - червоний .

Необхідна якість забарвлення знебарвлюється своєчасним припиненням знебарвлення препарату.

При недознебарвленні, коли ядра клітин інтенсивно забарвлені у фіолетовий колір, гонококи можуть зберігати фіолетове забарвлення; при перезнебарвленні, стафілококи і стрептококи можуть бути пофарбовані в оранжево-червоний колір і прийняті за гонококи.

Ідентифікація гонокока проводиться на підставі його морфологічних властивостей, локалізації та відношення до забарвлення за Грамом Гонококи - це парні коки, що мають форму кавових зерен, звернені один до одного увігнутою стороною.

Розмножуючись поділом у різних площинах ланцюжків не утворюють. Усередині лейкоцитів гонококи розташовуються парами або групами таким чином, що одні з них лежать по відношенню до інших під кутом.

Позаклітинні гонококи також мають характерні особливості. Найчастіше вони у великій кількості лежать у клітинах плоского епітелію рядами з розташуванням усередині ряду перпендикулярно один до одного. Частота всередині та позаклітинної локалізації гонококів залежить як від природи захворювання, так і від методики взяття матеріалу. При ідентифікації гонокока необхідно враховувати всі три його основні ознаки. Позитивний висновок дається при виявленні типових форм гонококу.

Піхвова трихомонада забарвлюється блідо: оболонка у вигляді тонкої смужки оточує сітчасту цитоплазму оранжево - червоного кольору, ядро ​​бузкового або фіолетового кольору, джгутики та ундулююча мембрана не проглядається.

Виявлення піхвових трихомонад у досліджуваному матеріалі щодо нативного препарату.

Метод заснований на виявленні збудника в препараті щодо його руху серед клітинних елементів та мікроорганізмів.

Реактив.1. Ізотонічний розчин натрію хлориду.

Приготування препаратів. На предметне скло наносять краплю теплого ізотонічного розчину натрію хлориду і змішують з досліджуваним відокремлюваним з вогнища захворювання. Завис накривають покривним склом і мікроскопують.

Мікроскопія.Піхвову трихомонаду визначають за грушоподібною, округлою або овальною формою, невеликою величиною (трохи більше лейкоциту), характерними поштовхоподібними рухами ундулюючої мембрани та джгутиків, які особливо добре видно під мікроскопії з темнопольним або фазовоконтрастним конденсором.

Вагініт (кольпіт) -запалення слизової оболонки піхви. Викликається стрепто- та стафілококами, трихомонадами та грибками. Може виникнути за недотримання правил особистої гігієни при гіпофункції яєчників, цукровому діабетіта ін.

При лабораторному дослідженні відзначається значна кількість дегенеративно змінених лейкоцитів та клітин багатошарового плоского епітелію.

Канідозний кольпіт.Викликається грибками роду Candida.

При лабораторному дослідженні в мазках відзначається наявність великої кількості лейкоцитів та потовщених фрагментованих паличок

(Грибків роду Candida). Іноді спостерігається наявність міцелію цих грибків.

Лептотрікс.Викликається дріжджоподібними грибками.

Мікроскопічно у мазках усередині потовщених фрагментованих паличок відзначається наявність червоних включень.

Гарднельоз.Викликається гарднерелою. Діагнозується в мазках, що містять невелику або помірну кількість лейкоцитів, рясної дрібної кокової піхвової флори і "ключових клітин" (клітин - пасток), часто покритих коккобактеріями.

При гарднельоз відзначається риб'ячий запах вагінальних виділень при додаванні 1-2 крапель 10% розчину КОН.

Вірус папіломи людини (ВПЛ).

Ознаки:

Наявність койлоцитів, тобто. клітин із потовщеними краями цитоплазми, широкою прозорою перенуклеарною зоною та округлим гіперхромним ядром.

Двоядерних та багатоядерних клітин.

Дискаріоз.

Койлоцити нерідко поєднуються з дисплазією багатошарового плоского епітелію.

Сифіліс - інфекційне захворювання, що характеризується хронічною рецидивною течією з ураженням усіх органів та систем Передається переважно статевим шляхом. Збудник - бліда трепонема, що має спіралеподібну форму з рівномірними витками, що звужуються на кінцях, що робить її схожою на штопор. Вона має активні рухи (згинальні, поступальні, ротарні, контрактильні).

Матеріалом для дослідження на бліду спірохету служить тканинна рідина, що відокремлюється твердого шанкеру, з ерозій, виразок, папул.

Дослідження проводять у темному полі зору.

Препарат для дослідження готують наступним чином: на предметне скло поміщають краплю фізіологічного розчину і таку кількість досліджуваного матеріалу. Змішують, накривають покривним склом та переглядають на темному тлі.

Серед фонових процесів, пов'язаних із гормональними порушеннями, виділяють ендоцервікози, поліпи, папіломи та просту форму лейкоплакії.

До ендоцервікозамвідносяться залізисті ерозії, псевдоерозії, залізисто-м'язові гіперплазії.

Морфологічно ендоцервікози неоднорідні, що дало підставу поділити їх на прості, що проліферують і гояться.

При простій формі ендоцервікозу призматичний епітелій поверхні та залоз не має ознак проліферації.

Проліферуючі форми характеризуються новоутворенням залізистих структур рахунок гіперплазії резервних клітин. При загоюючих ендоцервікозах відзначається або зростання багатошарового плоского епітелію з країв ендоцервікозу, і витіснення призматичного епітелію, або новоутворення багатошарового плоского епітелію шляхом метаплазії з резервних клітин призматичного епітелію. У мазках при ендоцервікозі можуть з'являтися клітини призматичного та багатошарового плоского епітелію.

Аденоматозні поліпи шийки маткиза своїми морфологічними ознаками нагадують ендоцервікози і за станом епітелію можуть бути поділені на прості, проліферуючі та епідермізуючі форми.

Прості формихарактеризуються наявністю на поверхні та в залозах клітин високого призматичного епітелію з базальним розташуванням ядер.

При проліферуючі формивідзначається гіперплазія резервних клітин із новоутворенням залоз.

При епідермізуючихз'являються клітини метапластичного багатошарового плоского епітелію.

Лейкоплакія (Проста форма) шийки матки є виразом прозоплазії, тобто підвищення рівня диференціювання багатошарового плоского епітелію.

При простій формі лейкоплакії відзначається потовщення багатошарового плоского епітелію, незначний акантоз та різного ступеня вираженості гіпер- та паракератоз.

Висновок

Актуальність цієї теми очевидна, оскільки фонові

неспецифічні та специфічні захворюваннястатевої сфери є попередниками передракових та ракових захворювань жіночих статевих органів.

Проведення масових гінекологічних оглядів покликане забезпечити максимальну ефективність оглядів шляхом проведення цитологічних досліджень у кожної оглянутої жінки, що сприяє виявленню не лише фонових, а й передракових та ракових захворювань жіночих статевих органів.

Це дозволяє попередити та виявити онкологічні захворюванняу доклінічній стадії.

Лабораторні методи діагностики в акушерстві та гінекології – важливий компонент оцінки стану здоров'я жіночого організму.

Серед їхньої різноманітності особняком вже багато десятків років стоїть простий мазок на флору.

Інші його назви: мазок на ступінь чистоти, мазок на GN, гінекологічний мазок, бактеріоскопія сечостатевих органів, що відокремлюється, мікроскопія відокремлюваного з уретри, піхви і шийки матки.

Це дослідження дозволяє оцінити склад мікрофлори, підрахувати кількість лейкоцитів та клітин епітелію, а також діагностувати деякі ЗПСШ (гонорею, трихомоніаз).

Це рутинний, неінвазивний, економічний та досить інформативний метод, широко поширений у роботі лікаря-гінеколога.

Грунтуючись на його результатах, лікар має можливість визначити подальшу тактику ведення пацієнта та призначити відповідне лікування.

Коли виконують аналіз?

Як правило, мазок на флору береться за будь-якого первинного звернення жінки до гінеколога.

Також показаннями до забору мазка та його наступної мікроскопії є:

1. 1 Планові профілактичні огляди та диспансеризація.
2. 2 Патологічні білі (відділяється піхви, шийки матки, уретри), їх неприємний запах, рясний характер, зміна кольору.
3. 3 Передгравідарна підготовка в рамках планування природної та ЕКО-індукованої вагітності.
4. 4 Скринінг під час вагітності.
5. 5 Неприємні, болючі відчуття у нижній частині живота, які жінка не пов'язує з менструальним циклом.
6. 6 Болюче сечовипускання, дизурія, у тому числі симптоми уретриту, циститу. Урологічна патологія у жінок, як правило, вимагає консультації та огляду гінеколога.
7. 7 Закінчення прийому курсу антибіотиків з метою визначення характеру флори та можливостей її відновлення.

2. Забір матеріалу для дослідження

Взяття гінекологічного мазка можливе з трьох точок: уретри (при необхідності), задньобокового склепіння піхви та піхвової частини шийки матки.

Матеріалом для аналізу є вагінальні виділення, виділення з цервікального каналу, що відокремлюється з уретри (за показаннями).

Вагінальні виділення багатокомпонентні, до їх складу входять:

1. 1 Слиз цервікального каналу – потрібна для проникнення сперматозоїдів у порожнину матки та вище для запліднення. Її густота залежить від рівня естрогенів в організмі жінки, за її тягучістю можна судити про фазу менструального циклу.
2. 2 Секрет залоз зовнішніх статевих органів.
3. 3 Слущений епітелій піхви.
4. 4 Бактерії (піхвова флора). У нормі мікрофлора в мазку представлена ​​великою кількістю молочнокислих бактерій (грампозитивні палички Додерляйну) та незначною кількістю умовно-патогенної флори (найчастіше кокової).

2.1. Підготовка до паркану мазка

Перед забором матеріалу жінці необхідно дотриматися деяких умов:

1. 1 Аналіз краще здавати на 5-7 день. паркан відокремлюваного не здійснюється.
2. 2 Виключити застосування вагінальних свічок, лубрикантів, спринцювання та статеві контакти за 24 години до дослідження.
3. 3 Перед здаванням мазка не потрібно використовувати ароматизовані засоби для інтимної гігієни, туалет зовнішніх статевих органів краще виконати проточною водою.
4. 4 Небажано приймати гарячу ваннуна день здачі аналізу.

2.2. Техніка отримання матеріалу

• Мазок на флору береться до бімануального дослідження, жінка знаходиться на гінекологічному кріслі.
• У піхву вводиться двостулкове дзеркало типу Куско, оголюється (виводиться) вагінальна частина шийки матки.
• Орієнтуючись на неї, лікар спеціальним шпателем проводить забір матеріалу із задньобокового склепіння піхви та переносить його на предметне скло, яке після заповнення направлення доставляється до лабораторії для мікроскопічного дослідження.
• Аналіз із зовнішнього отвору уретри береться бактеріологічною петлею або ложкою Фолькмана. За наявності бажано взяти саме їх, трохи натискаючи на зовнішній отвір із зовнішнього боку.
• Аналіз із поверхні піхвової частини шийки матки беруть шпателем Ерба.

3. Як розшифрувати результати?

3.1. Нормальна флора

Останнім часом нормальному складу піхвової мікрофлори стали приділяти особливу увагу, оскільки було доведено, що саме цей фактор зумовлює репродуктивне здоров'я жінки, забезпечує місцевий імунітет, захист від патогенних бактерій, нормальний настання та перебіг вагітності.

У нормі 95% флори у жінки складають молочнокислі бактерії (інакше палички Додерляйну, лактобацили, лактобактерії).

У процесі своєї життєдіяльності лактобактерії переробляють глікоген, що вивільняється із клітин епітелію, з утворенням молочної кислоти. Саме вона забезпечує кисле середовище вагінального вмісту, яке заважає розмноженню факультативної та патогенної флори.

У кожної жінки у піхві мешкає 1-4 види лактобактерій, причому їх поєднання є суто індивідуальним.

При розшифровці результатів аналізу неможливо провести детальний аналіз мікрофлори піхви, лаборантом оцінюється лише співвідношення паличок та коків.

Відсутність коків та велика кількість грампозитивної паличкової флори (++++) прирівнюються до 1 ступеня чистоти піхви. Це спостерігається досить рідко, така ситуація характерніша для контрольних мазків після санації піхви або прийому антибіотиків.

Незначна кількість коків (+, ++) вважається нормою і свідчить про 2 ступені чистоти, але лише в тому випадку, якщо виявлено і паличкову флору (++, +++). Це добрий мазок.

Патологічним вважається (+++, ++++) і натомість зниження кількості паличок (+, ++). Такий результат називається 3 ступінь чистоти піхви. Ця ситуація потребує детального обстеження.

Велика кількість коків (++++) та повна відсутністьгрампозитивних паличок (Грам + паличок) у мазку свідчать про 4 ступені чистоти. В цьому випадку жінці потрібне обов'язкове лікування.

Таблиця 1 - Нормальні показники, що оцінюються при розшифровці результатів мікроскопії мазка на флору та GN Для перегляду клацніть по таблиці

3.2. Гонококки та трихомонади (Gn, Tr)

3.7. Дріжджоподібні гриби

- Одноклітинні мікроорганізми округлої форми. Піхвове середовище ідеальне для їх зростання та розвитку за рахунок високого вмісту глікогену.

Але за рахунок конкуруючої лактобацилярної флори за нормального рівня імунітету їх активного зростання не спостерігається. Для набуття патогенних властивостей грибкам роду Candida необхідні деякі умови:

1. 1 Стан імуносупресії,
2. 2 Наявність ендокринної патології,
3. 3 Злоякісні новоутворення,
4. 4 Період вагітності, дитячий та літній вік,
5. 5 Терапія глюкокортикостероїдами.

Виявлено не повинно бути. У виняткових випадках допускається їх поодиноке виявлення у матеріалі, взятому із задньобокового склепіння піхви, як складової частини факультативної флори. При цьому важливо врахувати наявність/відсутність скарг та клінічних проявів.

Виявлення ж суперечка та міцелію гриба в мазку свідчить про вагінальний кандидоз і потребує відповідного специфічного лікування.

Хоча і є досить інформативним діагностичним методом, він є актуальним лише при зіставленні результату мікроскопії зі скаргами та клінічними проявами.

Головним недоліком цього дослідження є неможливість ідентифікування конкретного збудника захворювання. За результатами аналізу мазка неможливо оцінити рівень та глибину ураження тканин.

Тому при виявленні запального процесу у мазку лікар може призначити додаткові методидіагностики, спрямовані на ідентифікацію збудника (ПЛР, бактеріологічне дослідження сечостатевих органів, що відокремлюється, та визначення чутливості до антибіотиків).